2.8 丁香酚丁香酚具有抗菌、防腐、降血压的作用，是丁香油水门汀的主要成分，目前，丁香酚是我国规定允许使用的食用香料，主要用于配制薄荷、坚果、辛香型食品香精和烟用香精。

如涉及作品内容、版权等问题，请与本网联系相关链接：二氢黄酮苷，-环糊精，2-羟丙基--环糊精，麦芽糖基--环糊精。计算不同温度下不同浓度环糊精溶液中的二氢黄酮苷含量，通过二氢黄酮苷与环糊精浓度的对应关系，选择合适的横纵坐标，绘制不同温度下的相溶解度曲线，结果如图2～4所示

在波长284am处测定紫外吸光度，绘制标准曲线。3、环糊精/二氢黄酮苷包合常数的测定包合常数K是主客体相互作用中的重要参数，与包合物性质密切相关，通过其数值可以判断环糊精与难溶性物质包合时相互作用力的大小，因此包合常数的测定在表征包合物性质时具有十分重要的意义。计算不同温度下不同浓度环糊精溶液中的二氢黄酮苷含量，通过二氢黄酮苷与环糊精浓度的对应关系，选择合适的横纵坐标，绘制不同温度下的相溶解度曲线，结果如图2～4所示。环糊精在食品领域有着广泛地应用，其可以作为主体分子包合疏水性客体分子，形成稳态结构，从而提高客体分子的溶解度和稳定性等理化性质，起到保护、稳定药物分子的作用。分别吸取二氢黄酮苷储备液0.4、0.6、0.8、1.0、2.0、3.0、5.0mL于7个10mL的比色管中，用甲醇定容至刻度，配制浓度为4～50mg/L的溶液。

QYC一200全温培养摇床：上海新苗医疗器械制造有限公司。由此可推断出在4～50mg/L浓度范围内，二氢黄酮苷的浓度与吸光度具有良好的线性关系。2、仪器与设备实验所用仪器、设备如表1所示

表2极差结果显示，水解温度(E)对末水坛紫菜多糖提取率影响最大，加酶量(D)的影响力次之，而水解时间(F)对多糖提取率影响最小。采用超声波辅助水提法最优工艺提取多糖后，再用D3E2F1工艺去除蛋白，最终多糖提取率为9.6％，与表2中8号试验结果9.5％基本持平。张双灵和吴琼英等均采用微波法提取条斑紫菜多糖，提取率分别为8.47％和5.358。（2）正交试验结果基于单因素试验结果，正交试验设计及结果见表2。

③随着水解时间的延长，多糖提取率先增大后减小，说明在一定时间范围内，蛋白质水解率随着水解时间延长而增加，因而测得的多糖浓度也不断增大，但时间过长会引起木瓜蛋白酶变性失活，使蛋白质水解率下降，另外长时间也会引起多糖的降解。然而末水坛紫菜中多糖含量非常高，如能高效提取，则可大大提高末水坛紫菜的附加值。

由图2可知：①多糖提取率随加酶量的增加而增大，当加酶量超过2％(mg／mL)后，多糖提取率增加缓慢并渐趋平缓。这说明该温度处于木瓜蛋白酶的最适反应温度范围内，此时蛋白质水解率最高，因而测得多糖浓度最高。然后，通过单因素试验考察了加酶量、水解温度及水解时间对多糖提取率的影响，并通过正交试验获得了木瓜蛋白酶去除蛋白的最优工艺参数：加酶量2％(mg／mL)、水解温度50℃、提取时间60min。这是因为在一定酶浓度范围内，底物蛋白质水解率随酶浓度增加而明显增加，因而测得的多糖浓度也不断增大，但当酶浓度超过该范围后，蛋白质的水解率增加缓慢直至趋于平衡，此时测得的多糖浓度也逐渐稳定。

8号试验工艺为D3E2F1，即加酶量为3％，从节约试剂角度选用加酶量为2％的D3E2F1工艺更合理。可见，超声波辅助水提-蛋白酶法是一种提取紫菜多糖的有效方法。②随着水解温度的增加，多糖提取率先增大后减小，在50℃时，多糖提取率最高。木瓜蛋白酶去除蛋白最优工艺为D3E2F1。

而马波等采用超声波辅助碱性果胶酶提取条斑紫菜多糖，得率为13.8％。因此，超声波辅助水提末水坛紫菜多糖最优工艺参数确定如下：提取温度65℃、提取时间3.5min、水料比30:1(mL／g)。

(2)首先通过单因素试验考察了提取温度、提取时间及水料比三个因素对多糖提取率的影响，并通过正交试验获得了超声波辅助水提末水坛紫菜多糖的最优工艺参数：提取温度65℃、提取时间3.5min、水料比30:1(mL／g)。(3)末水坛紫菜提取多糖后，余料可继续用于提取其他活性成分或直接用作肥料或饲料，从而使末水坛紫菜得到最大程度利用。

表1极差结果显示，水料比(C)对末水坛紫菜多糖提取率影响最大，其次是提取温度(A)，而提取时间(B)对多糖提取率影响最小。声明：本文所用图片、文字来源《中国食品添加剂》，版权归原作者所有。最终确定木瓜蛋白酶去除蛋白最优工艺如下：加酶量2％(mg／mL)、水解温度50℃、提取时间60min。考虑到超声波破碎细胞后多糖易溶出，以及木瓜蛋白酶可高效水解粗多糖中的蛋白质，因而本研究采用超声波辅助水提一蛋白酶法提取末水坛紫菜多糖，以期提高多糖提取率。目前，文献报道的紫菜多糖提取率结果差别较大，如王贤等采用微波法提取末水坛紫菜多糖，提取率为5.054％。在上述最优条件下提取末水坛紫菜多糖，多糖提取率达9.5％。

末水坛紫菜多糖最优提取工艺为A2B2C1，按此工艺提取多糖，然后用2％(mg／mL)的木瓜蛋白酶在45℃下水解60min去除蛋白，多糖提取率为8.5％，高于表1中所有试验结果。如涉及作品内容、版权等问题，请与本网联系相关链接：蛋白酶，果胶酶，木瓜蛋白酶。

2、木瓜蛋白酶去除蛋白工艺优化结果（1）单因素试验结果加酶量、水解温度、水解时间三个因素对末水坛紫菜多糖提取率的影响见图2。三、结论与讨论(1)末水坛紫菜作为坛紫菜生产中的下脚料，经济价值较低。

检测分析末水坛紫菜多糖的分子质量、结构组成及其生物活性，将是我们今后的研究重点。（2）正交试验结果基于单因素试验结果，正交试验设计及结果见表1

然后，通过单因素试验考察了加酶量、水解温度及水解时间对多糖提取率的影响，并通过正交试验获得了木瓜蛋白酶去除蛋白的最优工艺参数：加酶量2％(mg／mL)、水解温度50℃、提取时间60min。声明：本文所用图片、文字来源《中国食品添加剂》，版权归原作者所有。然而末水坛紫菜中多糖含量非常高，如能高效提取，则可大大提高末水坛紫菜的附加值。张双灵和吴琼英等均采用微波法提取条斑紫菜多糖，提取率分别为8.47％和5.358。

最终确定木瓜蛋白酶去除蛋白最优工艺如下：加酶量2％(mg／mL)、水解温度50℃、提取时间60min。如涉及作品内容、版权等问题，请与本网联系相关链接：蛋白酶，果胶酶，木瓜蛋白酶。

2、木瓜蛋白酶去除蛋白工艺优化结果（1）单因素试验结果加酶量、水解温度、水解时间三个因素对末水坛紫菜多糖提取率的影响见图2。表1极差结果显示，水料比(C)对末水坛紫菜多糖提取率影响最大，其次是提取温度(A)，而提取时间(B)对多糖提取率影响最小。

②随着水解温度的增加，多糖提取率先增大后减小，在50℃时，多糖提取率最高。(3)末水坛紫菜提取多糖后，余料可继续用于提取其他活性成分或直接用作肥料或饲料，从而使末水坛紫菜得到最大程度利用。

因此，超声波辅助水提末水坛紫菜多糖最优工艺参数确定如下：提取温度65℃、提取时间3.5min、水料比30:1(mL／g)。（2）正交试验结果基于单因素试验结果，正交试验设计及结果见表2。三、结论与讨论(1)末水坛紫菜作为坛紫菜生产中的下脚料，经济价值较低。③随着水解时间的延长，多糖提取率先增大后减小，说明在一定时间范围内，蛋白质水解率随着水解时间延长而增加，因而测得的多糖浓度也不断增大，但时间过长会引起木瓜蛋白酶变性失活，使蛋白质水解率下降，另外长时间也会引起多糖的降解。

这说明该温度处于木瓜蛋白酶的最适反应温度范围内，此时蛋白质水解率最高，因而测得多糖浓度最高。木瓜蛋白酶去除蛋白最优工艺为D3E2F1。

采用超声波辅助水提法最优工艺提取多糖后，再用D3E2F1工艺去除蛋白，最终多糖提取率为9.6％，与表2中8号试验结果9.5％基本持平。8号试验工艺为D3E2F1，即加酶量为3％，从节约试剂角度选用加酶量为2％的D3E2F1工艺更合理。

（2）正交试验结果基于单因素试验结果，正交试验设计及结果见表1。这是因为在一定酶浓度范围内，底物蛋白质水解率随酶浓度增加而明显增加，因而测得的多糖浓度也不断增大，但当酶浓度超过该范围后，蛋白质的水解率增加缓慢直至趋于平衡，此时测得的多糖浓度也逐渐稳定。